Влияние острой задержки мочи на активность ферментов в моче и в стенке мочевого пузыря и связь этих изменений с ишемией мочевого пузыря
В.И. Кирпатовский, С.А. Голованов, Д.Ю. Черников, Д.Э. Елисеев, О.Н. Надточий, Е.В. Сыромятникова
Москва
Острая задержка мочи (ОЗМ) является частым осложнением ДГПЖ, сопровождающимся значительным перерастяжением мочевого пузыря. Данные литературы последних лет свидетельствуют, что повышение внутрипузырного давления сопровождается ухудшением кровоснабжения стенки мочевого пузыря, а при длительной обструкции это приводит к хронической гипоксии и выраженным метаболическим и функциональным расстройствам. После деблокирования мочевого пузыря самостоятельное мочеиспускание часто не восстанавливается вследствие развившихся за период ОЗМ нарушений. Предположительно они могут быть следствием транзиторной ишемии мочевого пузыря, вызванной длительным повышением внутрипузырного давления.
Данное исследование посвящено сопоставлению выраженности метаболических изменений в мочевом пузыре, оцененной по изменению активности ряда мембраносвязанных и цитоплазматических ферментов в моче и в стенке мочевого пузыря, вызванных моделированием ОЗМ и кратковременной ишемией мочевого пузыря.
Опыты проведены на 20 белых беспородных крысах-самках массой 280–340 г. Для получения исходных данных всех крыс предварительно высаживали в обменные клетки на 1 сутки для сбора мочи, в которой определяли активность трансаминаз (АЛТ, АСТ), ЛДГ, щелочной фосфатазы, γ-глутамилтранспептидазы (ГГТП), N-ацетилгликозидазы (НАГ) и холинэстеразы (ХЭ). Для исключения влияния различий в диурезе рассчитывали активность ферментов в пересчете на 1 ммоль креатинина мочи. На следующие сутки под эфирным наркозом у этих крыс моделировали ОЗМ путем пережатия предпузырного отдела мочеиспускательного канала мягким микрососудистым зажимом на 4 часа (7 крыс) или вызывали ишемию мочевого пузыря пережатием тазового отдела аорты на 2 часа (7 крыс). После снятия обструкции мочевых путей или зажима с аорты крыс вновь помещали в обменные клетки на 1 сутки для повторного сбора мочи и определения в ней ферментативной активности. В конце эксперимента удаляли мочевой пузырь и готовили из него гомогенат, в котором также определяли активность изучаемых ферментов в пересчете на 1 мг белка гомогената. В качестве нормальных значений использовали активность ферментов в гомогенате интактного мочевого пузыря (6 опытов). Для исключения влияния возможного повреждения почек при ОЗМ и ишемии и почечного происхождения ферментурии определяли также концентрацию креатинина и натрия в крови и моче, из которых рассчитывали показатели клубочковой фильтрации и канальцевой реабсорбции натрия.
Статистическую достоверность разницы результатов оценивали по парному критерию Стьюдента и критерию Вилкоксона-Манна.
Определение активности ферментов в моче выявило достоверное возрастание ферментрузии как после ОЗМ, так и после ишемии мочевого пузыря у всех крыс этой серии (табл.1). Степень возрастания активности колебалась от 1,5 (ГГТП) до 18 раз (ЛДГ). Обращает на себя внимание, что активность цитоплазматических ферментов (АСТ, ЛГД) возрастала существенно больше, чем мембраносвязанных (ГГТП, НАГ).
В опытах с ишемией мочевого пузыря активность всех ферментов, в среднем, по группе также возрастала, но в меньшей степени. При этом статистически достоверные изменения получены только для цитоплазматических ферментов (АЛТ, АСТ, ЛДГ), а также для ХЭ.
Таблица 1
Выраженность ферментурии у крыс после ОЗМ и ишемии мочевого пузыря (МЕ/ммоль креатинина)
| Ферментурия | Контроль | ОЗМ | Контроль | Ишемия |
| АСТ | 1,1±0,3 | 5,8±1,6*** | 1,9±0,4 | 3,5±0,9* |
| АЛТ | 1,3±0,4 | 3,5±1,1* | 0,8±0,3 | 1,7±0,4* |
| ЛДГ | 3,3±1,1 | 54,3±12,1*** | 6,7±1,6 | 19,7±4,3** |
| ГГТП | 52,7±11,6 | 79,2±19,1* | 92,2±26.7 | 159,1±39,3 |
| НАГ | 27,0±4,4 | 104,8±26,3** | 36,4±4,1 | 51,1±11,9 |
| ХЭ | 13,6±2,9 | 18,5±7,1 | 10,3±3,1 | 20,6±4,2** |
Определение клубочковой фильтрации и реабсорбции натрия в почечных канальцах не выявило достоверных изменений после ОЗМ и ишемии по сравнению с исходными значениями, что исключало почечную природу увеличения ферментурии.
При определении активности ферментов в гомогенате ткани мочевого пузыря выявили достоверное снижение активности всех изученных ферментов, как после ОЗМ, так и после ишемии мочевого пузыря (табл. 2). Степень снижения составляла 1,5–5 раз для разных ферментов. При этом изменения активности цитоплазматических ферментов также были более значительными, чем мембраносвязанных. Ишемия приводила к несколько меньшему снижению ферментативной активности стенки мочевого пузыря, но различия с ОЗМ оказались статистически незначимыми.
Таблица 2
Активность ферментов в гомогенате мочевого пузыря (МЕ/мг белка) крыс после ОЗМ и ишемии
| Активность ферментов | Контроль | ОЗМ | Ишемия |
| АСТ | 312±12 | 121±24*** | 167,1±29** |
| АЛТ | 35,7±0,8 | 14,8±2,9*** | 17,9±4,3** |
| ЛДГ | 1687±76 | 662±98*** | 882±122** |
| ЩФ | 371±98 | 139±24* | 173±15* |
| ГГТП | 12,3±3,2 | 2,2±1,1* | 1,4±0,7** |
| НАГ | 397±73 | 281±18* | 181±56* |
| ХЭ | 47,1±4,8 | 30,3±4,1* | 69,9±21,4 |
Уменьшение ферментативной активности в стенке мочевого пузыря в сочетании с повышением активности ферментов в моче свидетельствуют, что именно мочевой пузырь является источником увеличения ферментурии, и это связано с его выраженным повреждением. Затрагивает ли это повреждение только эпителиальную выстилку, или оно также затрагивает и детрузор полученные данные установить не позволяют. Учитывая, что из стенки мочевого пузыря выходят не только цитоплазматические ферменты (АЛТ, АСТ, ЛДГ), но и ферменты, связанные с клеточными мембранами (ГГТП, НАГ), можно предполагать, что высокая ферментурия обусловлена не только повышением проницаемости цитоплазматической мембраны для крупных молекул, какими являются белки-ферменты, но и связана с деструкцией части клеток, предположительно эпителиальной выстилки. Схожесть изменений при ОЗМ и ишемии мочевого пузыря позволяет предполагать существенную значимость фактора нарушения кровоснабжения стенки мочевого пузыря при ОЗМ и его роль в развитии метаболических и функциональных нарушений. Некоторые количественные различия могут быть связаны с дополнительными факторами, действующими при ОЗМ, в частности, проникновением мочи в интерстиций в зонах нарушения эпителиальной выстилки.
