Паттерны генной экспрессии в мононуклеарной фракции периферической крови больных раком предстательной железы
М.И. Коган, М.Б. Чибичян, Д.И. Водолажский,
Н.Н. Тимошкина, Д.Г. Матишов
НИИ урологии и нефрологии Ростовского ГМУ;
Южный научный центр РАН, Ростов-на-Дону
Раннее выявление РПЖ представляется острой проблемой в онкоурологии. Нами исследован паттерн экспрессии генов в мононуклеарной фракции периферической крови (МНФ) пациентов с РПЖ. Цель исследования – изучить экспрессию генов, играющих критическую роль в клеточном цикле, апоптозе и малигнизации тканей при РПЖ.
Материалы и методы
В исследование включены 58 пациентов, которые составили 3 группы: 1-я – 20 больных с РПЖ: Т1b – 4 пациента, Т2 – 10, Т3 – 4, Т4 – 2 пациента; средний возраст 64,4 ± 2,07 года; уровень ПСА 31,3 ± 8,9 нг/мл; объем ПЖ 70,0 ± 8,6 см3. Во 2-ю группу вошли 25 пациентов с гиперплазией ПЖ; средний возраст 63,5 ± 1,9 года; уровень ПСА 4,1 ± 0,8 нг/мл; объем ПЖ 64,5 ± 7,21 см3. Контрольную (3-ю) группу составили 13 практически здоровых мужчин; средний возраст 47,4 ± 2 года; уровень ПСА 1,2 ± 0,45 нг/мл; объем ПЖ 26,0 ± 1,6 см3. Исследовали фракцию МНФ венозной крови, полученную методом дифференциального гемолиза. Экстракцию суммарной РНК из МНФ проводили по Хомчинскому. ПЦР-РВ в присутствии красителя SYBR Green I осуществляли по стандартной методике для определения экспрессии 9 ядерных (vegfA, vegfB, bcl2, bax, p53, tnf, gstp1, tert, malat1) генов и некодирующего митохондриального локуса (hv2). Количественную оценку уровня экспрессии генов рассчитывали относительно референтного гена β-актина согласно протоколу Bio-Rad.
Результаты
Сравнение величин генной экспрессии в исследованных группах позволили достоверно дискриминировать пациентов с ДГПЖ и условно здоровых мужчин: статистически достоверные различия были зафиксированы по 7 из 10 исследованных генов (vegfA, hv2, bcl2, bax, p53, gstp1, tert) (p < 0,05). При этом значительно увеличена экспрессия большинства генов в группе ДГПЖ по сравнению с 1-й и 3-й группами (кроме gstp1, tnf-α). Отмечены статистически незначимые различия между РПЖ Т1−2 и РПЖ Т3−4. Экспрессия гена hv2 достоверно увеличена во 2-й группе
и снижена в 1-й группе. Высокозначимо отношение величин экспрессии анти- (bcl2) и проапоптозного (bax) генов. Увеличение отношения 2ΔСt(bcl2)/2ΔCt (bax) при малигнизации тканей ПЖ статистически достоверно.
Выводы
Таким образом, для диагностики РПЖ представляется перспективным паттерн маркеров МНФ, продемонстрировавший хороший предиктивный уровень: bax, bcl2 и tnf-α. Прогностическим фактором малигнизации тканей ПЖ может служить изменение отношения экспрессии анти- и проапоптозных генов семейства Bcl2.
Материалы VI Конгресса Российского общества Онкоурологов
