Панель молекулярных маркеров для диагностики рака предстательной железы

А.В. Сивков, С.Е. Северин, М.В. Савватеева, А.А. Раевская, Н.Г. Кешишев, О.В. Шкабко ФГУ НИИ урологии; ГУЗ Московский НИИ меди- цинской экологии; биологический факультет МГУ им. М.В. Ломоносова

При злокачественных заболеваниях ПЖ одними из наиболее значимых событий на молекулярном уровне являются эпигенетические изменения генетического материала, в частности изменение статуса метилирования ДНК. Установлено, что опухолеспецифическое гиперметилирование 5′-регуляторных областей ряда генов, приводящее к их инактивации, можно использовать для диагностики разных патологических состояний ткани ПЖ. Нами были определены границы промоторных областей выбранных генов и выявлены GC-богатые участки, а также предложены пары праймеров для амплификации метилированной и неметилированной последовательностей данных генов, которые могут быть использованы для детекции данных маркеров методом метилспецифической ПЦР. С целью разработки и создания тест-системы для диагностики и контроля течения РПЖ было проведено исследование панели молекулярных маркеров GSTπ1, TMPRSS2, RARβ2 и RASSF1A.

Материалы и методы

Исследование было проведено на материале 157 пациентов, средний возраст которых составил 67,6 ± 7,7 года, а уровень ПСА – от 4 до 10 нг/мл. На основе гистологически верифицированных диагнозов были сформированы следующие экспериментальные группы: группа больных с хроническим простатитом (n = 30), группа пациентов с ДГПЖ разной степени (n = 55), группа больных с аденокарциномой ПЖ различной степени дифференцировки (n = 50), группа условно-здоровых доноров без выявленных патологий ПЖ (n = 22). Для сравнения параметров получаемого генетического материала и эффективности проведения амплификации, а также в целях экономической целесообразности исследования были выбраны следующие типы биологического материала: кровь, моча, собираемая после выполнения ПРИ ПЖ, и образцы ткани ПЖ, полученные при биопсии как наиболее полноценный тип материала для исследования. На основании сформированного банка образцов ДНК была проведена оценка чувствительности, специфичности, определена положительная и отрицательная прогностическая ценность панели маркеров РПЖ.

Результаты

При анализе характеристик диагностической системы маркеров РПЖ, вычисленных с помощью выборки образцов ДНК, которые были выделены из ткани ПЖ, чувствительность составила 86,3 %, специфичность – 76,6 %, а при выделении образцов ДНК из мочи эти показатели равнялись 72,5 и 44,6 % соответственно. При анализе характеристик диагностической системы, вычисленных на выборке образцов ДНК, выделенных из крови, чувствительность составила 67,1 %, специфичность – 52,2 %, а из лимфоцитов – 66 и 61,7 % соответственно.

Выводы

При сравнении диагностических характеристик маркеров GST π1, RARβ2 и RASSF1A с ПСА специфичность нашей диагностической системы превосходит ПСА (61,7 против 5 %, р < 0,05).

Наиболее эффективное выделение геномной ДНК возможно из образцов ткани ПЖ, цельной крови и лимфоцитов.

Сочетанное применение данных маркеров в клинической практике будет способствовать более точной постановке диагноза.

Разработка системы ДНК-маркеров заболеваний ПЖ в будущем позволит эффективно осуществлять скрининг заболеваний на ранних этапах его возникновения, проводить превентивную терапию и мониторинг в периоды ремиссий, детектировать наличие микрометастазов в период лечения и определять тактику терапии в случае инактивации определенных генов.

Материалы VI Конгресса Российского общества Онкоурологов