Клиническое применение метода флуоресцентной in situ гибридизации для диагностики и прогнозирования рецидива немышечно-инвазивного рака мочевого пузыря

О.Б. Карякин, А.В. Севанькаев, А.В.Троянов, Г.Ф. Михайлова
ФГБУ МРНЦ Минздравсоцразвития России, Обнинск

На современном этапе все большую роль в диагностике онкологических заболеваний играют молекулярно-биологические методы исследования. Значительное место в них занимают молекулярно-цитогенетические методы анализа хромосомных нарушений на основе флуоресцентной in situ гибридизации клеток (FISH). Разработан и успешно применяется в ряде зарубежных клиник (США, Германия, Италия, Испания, Япония и др.) набор молекулярно-цитогенетических зондов UroVysion (Аbbot-VYSIS) для центромер хромосом 3, 7, 17 и генного локуса 9р21 хромосомы 9 при диагностике РМП. В клинических исследованиях показаны высокие специфичность (96 %) и чувствительность (81 %) метода.

При совместном использовании UroVysion и цистоскопии (чувствительность – 76 %) общая чувствительность повышается до 97 %. Также установлено, что тест UroVysion, выполненный у первичных больных, позволяет прогнозировать возможные рецидивы в зависимости от спектра хромосомных нарушений: при полиплоидии хромосом 3 и 7 вероятность развития рецидива минимальна. При нарушениях хромосом 17 и 9 риск возникновения рецидива возрастает до 65 %. Наблюдались также случаи, когда при использовании клинико-лабораторных методик (цитология, биопсия и цистоскопия) наличие опухоли МП не было диагностировано, в то время как тест UroVysion давал положительный результат. В последующем в течение 6–15 мес наблюдения молекулярно-цитогенетический диагноз подтверждался и клинико-лабораторными методами. По последним данным литературы, при постклиническом наблюдении за больными, перенесшими хирургическое вмешательство, было установлено, что в группах пациентов с положительными результатами FISH-анализа более часто развиваются рецидивы, чем в группах с отрицательными результатами. Так, в работе O.N. Gofrit et al. при обследовании 64 больных у 21 пациента в период наблюдения (медиана наблюдения – 13,5 мес) выявлено развитие рецидива опухоли. При этом в подгруппе с отрицательными результатами FISH-анализа (37,5 %) развитие рецидива опухоли в период наблюдения зафиксировано только у 12,5 % больных, а в подгруппе с положительными результатами (62,5 %) – у 45 %. Авторы также отмечают, что у 18 (86 %) пациентов с рецидивами опухоли положительные результаты FISH-анализа предшествовали клиническому диагнозу рецидива опухоли. В работе B.J. Yoder et al. также было показано, что часть пациентов, находящихся под наблюдением в связи с возможным развитием рецидива РМП, имели положительные результаты FISH-анализа без подтверждения рецидива цистоскопией. У половины этих больных рецидив опухоли развился в течение 29 мес.

Материалы и методы

На протяжении 2006–2011 гг. нами была обследована группа из 60 первичных пациентов (55 мужчин и 5 женщин) с диагнозом РМП (гистологически – уротелиальный рак) при Ta и T1 стадиях заболевания. Возраст обследованных варьировал от 24 до 74 лет. У 55 из этих больных результаты FISH-анализа оказались положительными, у 5 – отрицательными. Таким образом, у 91 % обследованных с помощью FISH-метода пациентов изменения в уротелиальных клетках расценивались как злокачественные. Всем больным была выполнена ТУР опухолей МП с/без дальнейшего проведения адъювантной терапии. В настоящее время продолжается регулярное обследование и наблюдение за данными больными. Каждые 3 мес проводится цистоскопическое обследование этих пациентов и осуществляется забор образцов мочи на FISH-анализ. У 45 больных был выполнен FISH-анализ с одновременным проведением цистоскопического обследования при сроках наблюдения от 3 до 60 мес. У 16 пациентов были выявлены рецидивы заболевания на разных сроках наблюдения. Выполнен статистический анализ полученного материала, при котором определялось наличие связи между возникновением рецидива заболевания и частотой изменения маркерных хромосом (3, 7, 17, локус 9p21) в процессе наблюдения (клинические признаки рецидива на момент забора материала для FISH-анализа отсутствовали), с целью определения возможностей FISH-метода в прогнозировании развития рецидива.

Результаты

По результатам анализа получены данные о достоверной корреляции между гиперплоидией хромосомы 3 более чем в 10 % оцененных клеток уротелия (p = 0,000470), гиперплоидией хромосомы 7 (р = 0,007122), гиперплоидией хромосомы 17 более чем в 10 % оцененных клеток уротелия (р = 0,045262) и дальнейшим развитием рецидива немышечно-инвазивного РМП.

Достоверной связи между гипоплоидией хромосом 3, 7, 17, а также полной или частичной делеции локуса 9р21 и развитием рецидива на данном этапе работы не получено.

В настоящий момент продолжаются наблюдения за пациентами с регулярным выполнением комплекса обследования, а также обработка полученного материала.

Вывод

В соответствии с предварительными результатами можно сделать вывод о возможной клинической ценности FISH-метода в прогнозировании развития рецидива у пациентов с немышечно-инвазивным РМП.

Материалы VI Конгресса Российского общества Онкоурологов