Молекулярно-генетический анализ области AZF, гена CFTR и CAG-повтора гена AR у мужчин с бесплодием

Михайленко Д.С., Бабенко О.В., Никифорова О.К., Зарецкая Н.В., Курносова Т.Р., Залетаев Д.В.
НИИ Молекулярной медицины при ММА им. И.М. Сеченова
Медико-генетический научный центр РАМН
Клиника акушерства и гинекологии ММА им. И.М. Сеченова
Клинико-диагностическая лаборатория “Ферти-Лаб”


Введение
   Среди генетических причин мужского бесплодия в настоящее время активно исследуют микроделеции Y-хромосомы (области AZFa, b, c), мутации гена CFTR и аллели CAG-повтора гена AR. По данным различных авторов, олиго- и азооспермия могут быть ассоциированы с «длинными» аллелями CAG-повтора гена андрогенового рецептора (AR), обуславливающих сниженную способность рецептора активировать гены-мишени.

Цель исследования
   Изучение длины CAG-повтора AR при идиопатическом бесплодии у мужчин после исключения других молекулярно-генетических факторов, приводящих к мужскому бесплодию.

Материалы и методы
   Исследовано 115 образцов ДНК неродственных пациентов с мужским бесплодием. Контрольная группа включала 120 образцов ДНК доноров крови. Проанализированы микроделеции Y-хромосомы по 6 STS-маркерам, а также 5 наиболее частых мутаций CFTR. Аллели CAG-повтора определяли с помощью флуоресцентной ПЦР с детекцией на генетическом анализаторе ABI3100 (GeneMapper v.3.5., “Applied Biosystems”), регрессионный анализ выполнен с использованием STATISTICA v.6.0.

Результаты и обсуждение
   Делеции AZF обнаружены у 8 пациентов с олиго- и азооспермией, пациент с агенезией семявыносящих протоков имел CFTR генотип delF508/5T. Мы исключили эти 9 случаев из первоначальной выборки и провели сравнительный анализ 106 пациентов с идиопатическим бесплодием и 120 образцов контроля по длине CAG-повтора AR. Показано, что аллели > 26(CAG) ассоциированы с двукратным увеличением относительного риска развития идиопатического бесплодия в популяции Европейской части России (Р > 0.01, a = 0.05). Коэффициенты в уравнении регрессии b₀ и b_x равны 0.362 (SD = 0.267) и 0.037 (SD = 0.012), соответственно.

Заключение
   Аллели > 26(CAG) гена AR ассоциированы с увеличением относительного риска развития идиопатического бесплодия в рассматриваемой выборке и могут быть использованы в качестве маркеров предрасположенности в комплексной молекулярно-генетической диагностике при бесплодии у мужчин.