Анализ молекулярных маркеров рака предстательной железы в плазме крови

Т.В. Кекеева, Б.Я. Алексеев, П.В. Шегай, М.В. Немцова, Д.В. Залетаев

Научно-исследовательский институт молекулярной медицины при Московской медицинской академии им И.М. Сеченова, Москва
Московский научно-исследовательский онкологический центр им. Герцена, Москва
Медико-генетический научный центр Российской академии медицинских наук, Москва



Введение
   Обнаружение специфичных для опухоли нуклеиновых кислот в крови больных раком предстательной железы, включающих различные эпигенетические и генетические изменения, такие как гиперметилирование генов-супрессоров опухолевого роста, повышение уровня экспрессии простатспецифических белков, микросателлитная нестабильность, может являться одним из направлений поиска неинвазивных диагностических маркеров рака предстательной железы.

Цель исследования
   Определить частоту метилирования гена GSTP1 и уровень экспрессии гена PSCA в плазме крови больных раком предстательной железы и сравнить полученные данные с контролем (здоровые доноры).

Материалы и методы
   Исследован 21 образец плазмы крови больных раком предстательной железы, 4 образца плазмы крови здоровых доноров методами метилчувствительной ПЦР и количественной OT-ПЦР в реальном времени. Уровень экспрессии оценивался относительно эндогенного контроля (гена B2M) сравнительным Ст методом.

Результаты и обсуждение
   Метилирование гена GSTP1 c высокой частотой обнаруживается в ткани опухоли и является ранним событием канцерогенеза рака предстательной железы. Аномальное гиперметилирование этого гена найдено у больных РПЖ также в плазме крови, моче, семенной жидкости. Гиперметилирование промотора гена GSTP1 в крови больных составило 47% (8/17). У 3-х здоровых доноров и 1 пациента с хроническим простатитом метилирование GSTP1 не обнаружено. Ген PSCA кодирует простатспецифичный гликопротеин, экспрессия которого у больных раком предстательной железы многократно увеличивается. Уровень относительной экспрессии гена PSCA был проанализирован на 7 образцах плазмы больных и 3 образцах плазмы здоровых доноров. В 86%(6/7) случаев количество мРНК гена PSCA в крови больных раком предстательной железы по сравнению с контролем увеличено в 10-10² раз.

Заключение
   Мониторинг опухолеспецифичных генетических изменений в плазме крови может иметь важное значение для неинвазивной детекции рака предстательной железы на ранних стадиях. Предварительные результаты настоящей работы свидетельствуют о высокой чувствительности применяемых методов для выявления опухолеспецифической ДНК и мРНК в плазме крови.