Динамика селективной энзимурии при экспериментальном нефролитиазе: патогенетическое обоснование применения антагонистов кальция
А.Б. Батько
Санкт-Петербург
Создание модели экспериментальной модели нефролитиаза позволяет определить точку приложения различных лекарственных средств в коррекции цепи патологических изменений, сопровождающих мочекаменную болезнь (МКБ). Экспериментальный нефролитиаз (ЭН) вызывали по методике S. Kumar (1991) с нашими дополнениям (рац. предл. №1792 от 04.12.2008). Исследование проведено в осенний период на аутбредных крысах-самцах линии Wistar, массой 220–270 гр., которых содержали на стандартной диете в естественном световом режиме. Животные находились в индивидуальных клетках, приспособленных для сбора мочи. В работе исследовали антагонисты кальция (АК): производные дигидропиридина (нифедипин) и бензопирана (диуманкал). Введение препаратов осуществлялось внутрижелудочно с помощью атравматичного зонда один раз в сутки, в строго установленное время в дозах, соответствующих ED50.
Экспериментальные животные были разделены на шесть групп. Интактным животным (интактная группа – ИГ, n=6) в качестве плацебо вводили 1% крахмальную взвесь в объеме до 2 мл. Контрольные животные (контрольная группа – КГ, n=5), получали 1% раствор этиленгликоля вместо воды ad libitum. Группа животных получала нифедипин в дозе 11 мг/кг с момента начала эксперимента, (нифедипин профилактика – НП, n=6), следующая группа получала нифедипин в той же дозе с 21-го дня эксперимента (с момента достижения экспериментальной патологии) на протяжении 14 дней (нифедипин лечение – НЛ, n=6). Остальные две группы животных получали диуманкал в дозе 5 мг/кг по аналогичной схеме: одна группа с 1-го по 21-й день эксперимента (диуманкал профилактика – ДП, n=5 n=5), другая – с 21-го, на протяжении 14 дней (диуманкал лечение – ДЛ, n=6).
О функциональном состоянии почек судили по концентрации мочевины и креатинина в сыворотке крови и моче, относительной плотности мочи, диурезу. В качестве маркерных ферментов, отражающих повреждение почечного эпителия, было исследована зкскреция ферментов, обладающих высокой чувствительностью – лактатдегидрогеназы КФ1.1.1.27 (ЛДГ) и γ-глютамилтрансферазы КФ2.3.2.2 (ГГТ). Маркерами повреждения почечного эпителия служили количественные изменения экскреции ЛДГ и γ-ГТГ в пересчете на экскрецию креатинина в сутки (таб. 1).
Таблица 1
Динамика энзимурии при ЭН
| Показатель | ИГ | КГ (7 сутки) | КГ (14 сутки) | КГ (21 сутки) |
| ЛДГ | 0,32±0,01 | 2,42±0,02* | 1,6±0,03* | 0,4±0,04 |
| γ-ГТГ | 0,7±0,02 | 1,3±0,03 | 2,5±0,03* | 2,4±0,01* |
* – различия статистически значимы по сравнению с интактными животными, при р<0,05
В течение первой недели эксперимента экскреция ЛДГ выросла в 7,5 раз и свидетельствует о цитолизе клеток почечных канальцев, т.к. данный фермент является цитозольным и свидетельствует о разрушении клеток. Дальнейшее снижение экскреции ЛДГ свидетельствовало о развитии адаптивных механизмов почечных канальцев в патологических условия. В свою очередь, экскреция γ-ГТГ нарастала медленно и превышала исходные значения в 3,5 раза, начиная со второй недели и до конца эксперимента. Учитывая, что наибольшее количество γ-ГТГ обнаружено в почечной ткани, а сам фермент является мембраносвязанным, подобный длительный прирост энзимурии обусловлен повреждением мембран клеток почечных канальцев в условиях ЭН.
Упомянутые нами маркеры повреждения почечных канальцев, проявляющиеся энзимурией, явились наиболее информативными показателями фармакологической активности изучаемых АК, механизм действия которых в настоящее время достаточно изучен (таб. 2).
Таблица 2
Динамика энзимурии при ЭН в ходе лечения и профилактики АК
| Показатель | НП | ДП | НЛ | ДЛ |
| ЛДГ | 0,41±0,03 | 0,33±0,02* | 0,51±0,04* | 0,37±0,02* |
| γ-ГТГ | 1,5±0,06* | 1,3±0,05* | 1,12±0,03* | 0,71±0,01* |
* – различия статистически значимы по сравнению с КГ при р<0,05
На фоне профилактического применения АК отмечено снижение показателей активности энзимурии. На протяжении всего эксперимента в группах НП и ДП активность ЛДГ была выше, чем в ИГ, но статистически достоверно отличалась только от КГ, и была более выраженная при применении диуманкала. На фоне лечения показатели энзимурии приходили в норму только в группе ДЛ, статистически достоверно отличаясь от подобных показателей КГ, а в группе НЛ снижение γ-ГТГ произошло только на 46% к окончанию курса лечения.
Таким образом, эффект применения АК при ЭН можно обосновать ослаблением процесса цитолиза клеток почечных канальцев. Учитывая чувствительность клеточных мембран к мембранотропным веществам экзогенного происхождения, в роли которых выступают производные фенола, целесообразно считать, что преимущественная фармакологическая активность связана с химической структурой и наиболее выражена у производных бензопирана.
